富血小板血浆对牙髓干细胞增殖及成骨活性的影响解析

白甲一 （ 西安交通大学 ）

Abstract

目的：探讨富血小板血浆对牙髓干细胞的增殖与及成骨活性的作用。方法：采集本院口腔科门诊年 龄介于18至58岁患者拔除的牙齿样本，采用酶消化法进行牙髓干细胞（Stem Cells from Human Exfoliated Deciduous teeth, SHED）的培养。将细胞被随机分配至三个组别：对照组、3μmol/L组及10μmol/L组，并按照浓度梯度0μmol/L、 3μmol/L、10μmol/L对SHED细胞施加mPRP处理。运用MTT分析法探究mPRP对SHED细胞增殖活性的作用。通过应用 碱性磷酸酶（ALP）试剂盘，对mPRP处理后SHED细胞的ALP活性变化进行测定。采用逆转录-聚合酶链反应（RT_x005fPCR） 技术检测细胞内骨涎蛋白（BSP）与骨钙素（OCN）信使核糖核酸（mRNA）表达量的变化。结果：在使用改 良型牙髓细胞培养液（mPRP）培养的牙源性干细胞（SHED）中，观察到细胞展现出良好的生长形态。这些细胞以 单细胞形式呈现，具有成纤维细胞样特征，体积相对较小。大多数细胞呈现长梭形或多角形形态，部分细胞则呈现出 立方形。细胞质分布均匀，细胞体饱满。细胞培养过程中，细胞分裂周期为5至7天，适宜进行细胞传代操作；观察 到miRNA前体蛋白对牙髓干细胞（SHED）的增殖具有显著的促进效应。发现经3 pμmol/L和10 pμmol/L浓度的mPRP 处理后，SHED细胞的吸光度值（OD值）相较于未处理的对照组显著提高，且该差异在统计学上具有显著性（P < 0.05）。随着TM浓度的增加，检测到的光密度（OD）值呈现显著上升趋势（P < 0.05）；在关于碱性磷酸酶（ALP） 活性的研究中，观察到在3 μmol/L浓度组和10 μmol/L浓度组中，随时间推移，光密度（OD）值呈现显著增加趋势， 并且该变化在统计学上具有显著性差异（P < 0.05）。在3 pmol/L浓度组与10 μmol/L浓度组的实验中，所测定的光密度 （OD）值在不同时间点均显著超越对照组，并且该差异在统计学上呈现显著性（P < 0.05）；在3 μmol/L及10μmol/L 浓度水平的SHED细胞中，骨涎蛋白与骨钙素的信使核糖核酸(mRNA)表达量均显著超越对照组。此外，随着微小蛋白 富血小板血浆(mPRP)浓度水平的增加，其促进效应表现出逐渐增强的趋势(P < 0.05)。结论：mPRP能提升SHED细胞 的增殖及成骨活性，且该提升效果与其浓度和作用时间呈正相关。

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